实验背景：小胶质细胞是大脑中的主要免疫细胞，承担着重要的功能，如碎片吞噬、神经元支持和突触修剪。这些细胞与阿尔茨海默病（AD）等神经系统疾病的发生密切相关。不同亚群的小胶质细胞在神经环境中各负其责。虽然荧光显微镜能够区分其表型，但存在耗时长、通量低及主观性强等局限性。单细胞测序技术虽然能够进行高维分析，但因其成本高和数据分析技术门槛较高，限制了其普及。

为了应对这一挑战，来自美国俄克拉荷马大学健康科学中心的研究人员基于尊龙凯时的Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪，开发出一套高通量、简便易用的完整解决方案，实现小胶质细胞的精细化分型。这一方案不仅能扩展加入更多标志物，还能延伸应用于不同组织和疾病类型，且可以与全光谱分选型流式细胞仪无缝衔接，以便分选感兴趣的细胞，并进行后续的功能性实验。

细胞染色的步骤包括：1. 使用染色缓冲液重悬细胞，过滤得到新的流式管中的细胞。2. 离心及去除上清后，重悬细胞并添加Fc受体阻断剂以避免非特异性结合。3. 根据需要加入单标或多标抗体，4℃避光孵育，以确保充分结合。4. 最后通过洗涤和离心清洗细胞，为流式细胞术检测做好准备。

样本采集及数据分析方面，运用5激光Cytek®Aurora™全光谱分析型流式细胞仪进行样本采集，并通过软件功能提取自发荧光，以便于准确分析。借助FSC/SSC排除碎片以及FSC-A/FSC-H识别黏连体的干扰，最终识别出小胶质细胞。

根据标志物的表达情况，小胶质细胞可以细分为以下四类：稳态小胶质细胞、疾病相关小胶质细胞（DAM）、干扰素反应性小胶质细胞（IRM）、以及脂滴聚集的小胶质细胞（LDAM）。研究发现，不同年龄与性别的小鼠海马体内小胶质细胞的丰度存在显著差异，特别是在年老雌性小鼠中，DAM的比例显著升高。此外，雄性小鼠与雌性小鼠的小胶质细胞比例也有所不同，这表明在神经疾病—尤其是阿尔茨海默病的背景下，性别差异可能与免疫反应的差异有关。

综上所述，基于尊龙凯时的高通量检测技术为小胶质细胞的研究提供了一种有效的解决方案，不仅增强了对小胶质细胞特性的理解，也助力于未来在神经疾病研究中的应用与探索。